ផលិតផល

លក្ខណៈដែលឥទ្ធិពលនៃការផ្លាស់ប្តូរក្នុងពេលដំណាលគ្នារួមបញ្ចូលគ្នាដើម្បីផ្លាស់ប្តូរសកម្មភាពអង់ស៊ីមគឺមិនអាចទាយទុកជាមុនបានដោយងាយទេ ពីព្រោះឥទ្ធិពលទាំងនេះមិនតែងតែបន្ថែមក្នុងលក្ខណៈលីនេអ៊ែរទេ។ដូច្នេះ ការកំណត់លក្ខណៈនៃផលប៉ះពាល់នៃការផ្លាស់ប្តូរក្នុងពេលដំណាលគ្នានៃសំណល់អាស៊ីតអាមីណូដែលចងស្រទាប់ខាងក្រោមអាចរួមចំណែកយ៉ាងសំខាន់ដល់ការយល់ដឹងអំពីភាពជាក់លាក់នៃស្រទាប់ខាងក្រោមនៃអង់ស៊ីម។នៅក្នុង beta-glycosidase ពី Spodoptera frugiperda (Sfbetagly) ទាំងសំណល់ Q39 និង E451 មានអន្តរកម្មជាមួយស្រទាប់ខាងក្រោម ហើយនេះគឺចាំបាច់សម្រាប់កំណត់ភាពជាក់លាក់នៃស្រទាប់ខាងក្រោម។mutants ទ្វេរដងនៃ Sfbetagly (A451E39, S451E39 និង S451N39) ត្រូវបានរៀបចំដោយ mutagenesis ដែលដឹកនាំដោយគេហទំព័រ បង្ហាញនៅក្នុងបាក់តេរី និងបន្សុតដោយប្រើ affinity chromatography ។អង់ស៊ីមទាំងនេះត្រូវបានកំណត់លក្ខណៈដោយប្រើប្រាស់ p-nitrophenyl beta-galactoside និង p-nitrophenyl beta-fucoside ជាស្រទាប់ខាងក្រោម។សមាមាត្រ k cat/Km សម្រាប់ mutants តែមួយ និងពីរដងនៃ Sfbetagly ដែលមានការផ្លាស់ប្តូរដែលដឹកនាំដោយគេហទំព័រនៅទីតាំង Q39 និង E451 ត្រូវបានប្រើដើម្បីបង្ហាញថាឥទ្ធិពលលើថាមពលឥតគិតថ្លៃនៃ ESdouble dagger (ស្មុគ្រស្មាញនៃការផ្លាស់ប្តូរអង់ស៊ីម) នៃការផ្លាស់ប្តូរពីរដង (Gdouble daggerxy) មិនមែនជាផលបូកនៃផលប៉ះពាល់ដែលបណ្តាលមកពីការផ្លាស់ប្តូរតែមួយ (Gdouble daggerx និង Gdouble daggery)។ភាពខុសគ្នានេះនៅក្នុង Gdouble dagger បង្ហាញថាឥទ្ធិពលនៃការផ្លាស់ប្តូរតែមួយត្រួតលើគ្នាដោយផ្នែក។ដូច្នេះហើយ ឥទ្ធិពលទូទៅនេះរាប់បានតែម្តងគត់នៅក្នុង Gdouble daggerxy ។ទិន្នន័យគ្រីស្តាល់នៅលើ beta-glycosidases បង្ហាញពីវត្តមាននៃចំណងអ៊ីដ្រូសែន bidentate ដែលពាក់ព័ន្ធនឹងសំណល់ Q39 និង E451 និងក្រុម hydroxyl ដូចគ្នានៃស្រទាប់ខាងក្រោម។ដូច្នេះ ទាំងទិន្នន័យទែរម៉ូឌីណាមិក និងគ្រីស្តាល់បង្ហាញថាសំណល់ Q39 និង E451 មានឥទ្ធិពលទៅវិញទៅមកលើអន្តរកម្មរៀងៗខ្លួនជាមួយស្រទាប់ខាងក្រោម។