ផលិតផល

ស្រដៀងទៅនឹងមេរោគ RNA វិជ្ជមានផ្សេងទៀត មេរោគ tombusviruses ត្រូវបានចម្លងដោយភ្នាស-ចងមេរោគចម្លងស្មុគស្មាញ (VRC) ។VRC រួមមាន p92 virus-code RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) មេរោគ p33 RNA chaperone និងប្រូតេអ៊ីនម៉ាស៊ីនដែលជ្រើសរើសរួមគ្នាជាច្រើន។ដើម្បីក្លាយជា RdRp ដែលមានមុខងារបន្ទាប់ពីការបកប្រែរបស់វា ប្រូតេអ៊ីនចម្លង p92 គួរតែត្រូវបានបញ្ចូលទៅក្នុង VRC បន្ទាប់មកការធ្វើឱ្យសកម្មរបស់វា។យើងបានបង្ហាញពីមុននៅក្នុងការវិភាគដោយផ្អែកលើការស្រង់ចេញផ្សិតដោយគ្មានកោសិកាដែលថាការធ្វើឱ្យសកម្មនៃមេរោគ Tomato bushy stunt virus (TBSV) RdRp ទាមទារកត្តាម៉ាស៊ីនរលាយ។នៅក្នុងអត្ថបទនេះ យើងកំណត់អត្តសញ្ញាណប្រូតេអ៊ីនឆក់កំដៅកោសិកា 70 (Hsp70) ជាកត្តាម៉ាស៊ីនដែលបានជ្រើសរើសរួមគ្នាដែលតម្រូវសម្រាប់ការធ្វើឱ្យសកម្មនៃ TBSV RdRp ដែលត្រូវបានកាត់ផ្តាច់ដោយ N-terminally truncated recombinant ។លើសពីនេះទៀតការទប់ស្កាត់មុខងារ Hsp70 ដែលមានមូលដ្ឋានលើម៉ូលេគុលតូចរារាំងការសំយោគ RNA ដោយ tombusvirus RdRp នៅក្នុង vitro ។លើសពីនេះ យើងបង្ហាញថា phospholipids អព្យាក្រឹត ពោលគឺ phosphatidylethanolamine (PE) និង phosphatidylcholine (PC) បង្កើនសកម្មភាព RdRp នៅក្នុង vitro ។ផ្ទុយទៅវិញ phosphatidylglycerol (PG) បង្ហាញពីឥទ្ធិពលរារាំងខ្លាំង និងលេចធ្លោលើការធ្វើឱ្យសកម្មក្នុង vitro RdRp ។យើងក៏បង្ហាញផងដែរថា PE និង PC ជំរុញអន្តរកម្ម RdRp-viral plus-strand RNA [(+)RNA] ខណៈពេលដែល PG រារាំងការភ្ជាប់នៃ RNA មេរោគទៅនឹង RdRp ។ដោយផ្អែកលើតួនាទីរំញោចធៀបនឹងការរារាំងនៃសារធាតុ phospholipids ផ្សេងៗក្នុងការធ្វើឱ្យសកម្ម tombusvirus RdRp យើងស្នើថាសមាសធាតុ lipid នៃភ្នាសកោសិការងគោលដៅអាចត្រូវបានប្រើប្រាស់ដោយ tombusviruses ដើម្បីគ្រប់គ្រងការប្រមូលផ្តុំ VRC ថ្មីក្នុងអំឡុងពេលឆ្លងមេរោគ។ មេរោគ RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) ដែលទទួលខុសត្រូវក្នុងការសំយោគមេរោគ RNA progeny នៅក្នុងកោសិកាដែលឆ្លងមេរោគនៃមេរោគ RNA វិជ្ជមានជាច្រើនគឺអសកម្មដំបូង។យុទ្ធសាស្រ្តនេះទំនងជាដើម្បីជៀសវាងការសំយោគ RNA របស់មេរោគនៅក្នុង cytosol ដែលនឹងនាំឱ្យមានការបញ្ចូលកោសិកា RNA ដែលបង្កឡើងដោយការឆ្លើយតបប្រឆាំងមេរោគយ៉ាងឆាប់រហ័ស។កំឡុងពេលប្រមូលផ្តុំនៃស្មុគ្រស្មាញចម្លងតាមភ្នាស មេរោគ RdRp ត្រូវបានធ្វើឱ្យសកម្មតាមរយៈដំណើរការដែលមិនអាចយល់បានដែលធ្វើឱ្យ RdRp មានសមត្ថភាពសំយោគ RNA ។ដោយប្រើ TBSV RdRp យើងបង្ហាញថាកោសិកា Hsp70 chaperone និង phospholipids អព្យាក្រឹតជួយសម្រួលដល់ការធ្វើឱ្យសកម្ម RdRp នៅក្នុង vitro ។ផ្ទុយទៅវិញ phosphatidylglycerol (PG) មានឥទ្ធិពល inhibitory លេចធ្លោលើការធ្វើឱ្យសកម្មនៅក្នុង vitro RdRp និងអន្តរកម្ម RdRp-viral RNA ដែលបង្ហាញថា microdomain membranous ជុំវិញ RdRp ប៉ះពាល់យ៉ាងខ្លាំងដល់សមត្ថភាពរបស់វាសម្រាប់ការសំយោគ RNA ។ដូច្នេះ ការធ្វើឱ្យសកម្មនៃមេរោគ RdRp ទំនងជាអាស្រ័យលើសមាសធាតុម៉ាស៊ីនជាច្រើននៅក្នុងកោសិកាដែលឆ្លងមេរោគ។