ផលិតផល

អំបិល Tris acetate ត្រូវបានគេប្រើជាញឹកញាប់នៅក្នុងការរៀបចំនៃ TAE (Tris-acetate-EDTA) buffer ដែលត្រូវបានប្រើជាសតិបណ្ដោះអាសន្នដែលកំពុងដំណើរការ និងនៅក្នុង agarose gels។Tris Acetate-EDTA buffer ត្រូវបានប្រើសម្រាប់ DNA agarose gel electrophoresis ប៉ុន្តែក៏ត្រូវបានគេប្រើសម្រាប់ electrophoresis RNA agarose gel ដែលមិនមានលក្ខណៈdenaturing។DNA ខ្សែទ្វេមានទំនោរនឹងដំណើរការលឿននៅក្នុង TAE ជាងនៅក្នុងបណ្តុំផ្សេងទៀត ហើយអាចនឹងអស់កំលាំងកំឡុងពេលពង្រីក electrophoresis ។ចរន្តឈាមរត់របស់សតិបណ្ដោះអាសន្ន ឬការជំនួសសតិបណ្ដោះអាសន្នកំឡុងពេលពង្រីកអេឡិចត្រូហ្វ័រអាចជួសជុលសមត្ថភាពផ្ទុកទិន្នន័យទាប។អាច​ត្រូវ​បាន​ប្រើ​នៅ​កម្រិត​ផ្សេងៗ​ដើម្បី​សិក្សា​ពី​ការ​ចល័ត​របស់ DNA ក្នុង​ដំណោះ​ស្រាយ។ដោយសារ borate នៅក្នុង TBE buffer (Tris-Borate-EDTA Buffer, 10X Powder Pack, sc-296651) គឺជាសារធាតុទប់ស្កាត់ដ៏រឹងមាំសម្រាប់អង់ស៊ីមជាច្រើន នោះ TAE buffer ត្រូវបានណែនាំនៅពេលមើលកម្មវិធីអង់ស៊ីមសម្រាប់គំរូ DNA ។អំបិល Tris acetate ក៏ជាសតិបណ្ដោះអាសន្នដែលមានភាពប្រែប្រួលខ្ពស់ក្នុងការវិភាគ ATP ជាមួយនឹង firefly luciferase ។

ការប្រើប្រាស់៖ សតិបណ្ដោះអាសន្នដែលកំពុងដំណើរការ TAE គឺជាសតិបណ្ដោះអាសន្នដែលប្រើជាទូទៅបំផុតសម្រាប់ DNA agarose gel electrophoresis ហើយក៏ត្រូវបានគេប្រើសម្រាប់ Electrophoresis RNA agarose gel ដើមកំណើតផងដែរ។DNA ខ្សែទ្វេមានទំនោរធ្វើចលនាលឿនក្នុង TAE ជាងនៅក្នុងបណ្តុំផ្សេងទៀត ប៉ុន្តែក៏មិនអាចហែលបានដែរ ដោយសារតែការថយចុះនៃអ៊ីយ៉ុងទ្រនាប់ក្នុងអំឡុងពេល electrophoresis យូរ។ការជិះកង់សតិបណ្ដោះអាសន្ន ឬការផ្លាស់ប្តូរសតិបណ្ដោះអាសន្នក្នុងអំឡុងពេល electrophoresis អូសបន្លាយអាចទូទាត់សងសម្រាប់សមត្ថភាពសតិបណ្ដោះអាសន្នទាប។2 ពនឺសតិបណ្ដោះអាសន្ន TAE ដែលប្រមូលផ្តុំដើម្បីទទួលបាន 1 mMTAE buffer ដែលមាន 40 mM Tris acetate និង 1 mM EDTA, pH 8.3 ។1 mMTAE buffer អាចត្រូវបានប្រើទាំងនៅក្នុង agarose gels និងជាសតិបណ្ដោះអាសន្នដែលកំពុងដំណើរការ។សម្រាប់គុណភាពបង្ហាញអតិបរមា វាត្រូវបានណែនាំថាតង់ស្យុងដែលបានអនុវត្តគឺទាបជាង 5V/cm (ចម្ងាយរវាងអេឡិចត្រូតឯកតា)។

កម្មវិធី៖ សតិបណ្ដោះអាសន្នដែលកំពុងដំណើរការ TAE គឺជាសតិបណ្ដោះអាសន្នដែលប្រើជាទូទៅបំផុតសម្រាប់ DNA agarose gel electrophoresis នៅក្នុង Chemicalbook gel ហើយវាក៏ត្រូវបានប្រើសម្រាប់ RNA agarose gel electrophoresis ដែលមិនមានជាតិពណ៌ផងដែរ។DNA ខ្សែទ្វេមានទំនោរធ្វើចលនាលឿនក្នុង TAE ជាងនៅក្នុងបណ្តុំផ្សេងទៀត ប៉ុន្តែក៏មិនអាចហែលបានដែរ ដោយសារតែការថយចុះនៃអ៊ីយ៉ុងទ្រនាប់ក្នុងអំឡុងពេល electrophoresis យូរ។ការជិះកង់សតិបណ្ដោះអាសន្ន ឬការផ្លាស់ប្តូរសតិបណ្ដោះអាសន្នក្នុងអំឡុងពេល electrophoresis អូសបន្លាយអាចទូទាត់សងសម្រាប់សមត្ថភាពសតិបណ្ដោះអាសន្នទាប។សតិបណ្ដោះអាសន្ន TAE ប្រមូលផ្តុំត្រូវបានពនឺដើម្បីទទួលបាន 1 mMTAE buffer ដែលមាន 40 mM Tris acetate និង 1 mM EDTA, pH 8.3 ។1 mMTAE buffer អាចត្រូវបានប្រើទាំងនៅក្នុង agarose gels និងជាសតិបណ្ដោះអាសន្នដែលកំពុងដំណើរការ។សម្រាប់គុណភាពបង្ហាញអតិបរមា វាត្រូវបានណែនាំថាតង់ស្យុងដែលបានអនុវត្តគឺទាបជាង 5V/cm (ចម្ងាយរវាងអេឡិចត្រូតឯកតា)។

ការប្រើប្រាស់៖ ក្នុងការរកឃើញ ATP ជាមួយនឹង firefly luciferase ផលិតផលនេះគឺជាសតិបណ្ដោះអាសន្នដែលរសើបបំផុត;ការរកឃើញការភ្ជាប់ glutamate ។

ការផ្សារភ្ជាប់ដែលអាចផ្លាស់ប្តូរបាននៃ [3H] អាស៊ីត l-glutamic ទៅនឹងវត្ថុធាតុដើមដែលមិនមែនជាអ្នកទទួល។

[3H]ការភ្ជាប់អាស៊ីត L-glutamic ទៅនឹងបំពង់មីក្រូហ្វុយហ្គាស និងកញ្ចក់ត្រូវបានស៊ើបអង្កេតក្នុងទ្រនាប់ចំនួនបួន។ការផ្សារភ្ជាប់ផ្ទៃខាងក្រោយទៅនឹងវត្ថុធាតុទាំងនេះគឺមានភាពធ្វេសប្រហែស ប៉ុន្តែត្រូវបានបង្កើនដោយការ centrifugation ឬការបឺតនៅក្នុង Tris-HCl និង Tris-citrate buffer ។ការចងនេះគឺតិចជាងច្រើន ឬនៅពេលដែល HEPES-KOH ឬ Tris-acetate buffer ត្រូវបានប្រើជំនួសវិញ។[3H]ការភ្ជាប់ L-glutamate ទៅនឹងបំពង់មីក្រូហ្វុយហ្គាល់ត្រូវបានរារាំងដោយ L- ប៉ុន្តែមិនមែន D-isomers នៃ glutamate និង aspartate ទេ។អាស៊ីត DL-2-amino-7-phosphonoheptanoic ក៏មិនរារាំងការចងដែរ។សមាសធាតុផ្សេងទៀតដែលបង្ហាញពីការទប់ស្កាត់កម្រិតទាបទៅមធ្យមគឺ៖ N-methyl-D-aspartate, quisqualate, L-glutamic acid diethyl ester, N-methyl-L-aspartate, kainate និង 2-amino-4 -phosphonobutyrate ។ការចងត្រូវបានរារាំងដោយភ្នាសខួរក្បាលរបស់សត្វកណ្តុរដែលខូច។ការចង glutamate ដែលពឹងផ្អែកលើប្រូតេអ៊ីន [3H] ត្រូវបានគេទទួលបានជាមួយនឹងការរៀបចំភ្នាសដែលបានបង្កកម្តងហើយម្តងទៀត នៅពេលដែលការចងត្រូវបានធ្វើឡើងនៅក្នុងបណ្តុំ Tris-acetate ។វាត្រូវបានណែនាំថា Tris-acetate ឬ HEPES -KOH buffer គួរតែត្រូវបានប្រើក្នុងការវិភាគ glutamate binding ។ប្រសិនបើ Tris-HCl ឬ Tris-citrate buffer ត្រូវបានប្រើប្រាស់ ការពិសោធន៍ត្រួតពិនិត្យសមស្របគួរតែត្រូវបានធ្វើ ដើម្បីកែតម្រូវសម្រាប់ការភ្ជាប់ទៅបំពង់មីក្រូហ្វៀ ឬតម្រងសរសៃកញ្ចក់។