ផលិតផល

Monogalactopyranosides នៃ fluorescein និង fluorescein methyl ester: ការសំយោគ អ៊ីដ្រូលីស្ទីម អង់ស៊ីមដោយ biotnylated β-galactosidase និងការកំណត់មេគុណបំប្លែងការបកប្រែ

Fluorescein monoglycosides (d-galactopyranoside (FMG) និង d-glucopyranoside) និង methyl ester (MFMG) របស់ពួកគេត្រូវបានរៀបចំពី acetobromoglucose/galactose និង fluorescein methyl ester ក្នុងទិន្នផលល្អ។ការពិសោធន៍អ៊ីដ្រូលីស្ទីកអង់ស៊ីម (ដោយប្រើប៊ីតា-ហ្គាឡាក់តូស៊ីដេស biotinylated) នៃដេរីវេ ហ្គាឡាក់តូ ត្រូវបានអនុវត្ត ហើយប៉ារ៉ាម៉ែត្រ kinetic ត្រូវបានគណនា។ការកើនឡើង 15-20 ដងនៃអាំងតង់ស៊ីតេ fluorescence ត្រូវបានគេសង្កេតឃើញក្នុងអំឡុងពេល hydrolysis ។ការកើនឡើងលីនេអ៊ែរនៃ fluorescence ត្រូវបានកត់សម្គាល់ក្នុងរយៈពេលខ្លី និងកំហាប់ទាបនៃស្រទាប់ខាងក្រោម ដែលធ្វើឱ្យសមាសធាតុទាំងនេះមានប្រយោជន៍ និងមានការស៊ើបអង្កេតរសើបសម្រាប់ galactosidases ។ទំហំនៃតម្លៃថេរ Michaelis-Menten (Km) សម្រាប់ MFMG គឺខ្ពស់ជាង FMG ដែលបង្ហាញពីការផ្លាស់ប្តូរទម្រង់ដែលអាចកើតមាននៃស្រទាប់ខាងក្រោម fluorogenic ។តម្លៃ Km សម្រាប់ biotinylated β-Gal ជាមួយ FMG គឺទាបជាងអង់ស៊ីមដើម។ការសង្កេតនេះបង្ហាញពីភាពស្និទ្ធស្នាលនៃស្រទាប់ខាងក្រោមខ្ពស់នៃអង់ស៊ីម biotinylated បើប្រៀបធៀបទៅនឹងអង់ស៊ីមដើម។មេគុណនៃការបំភាយការបកប្រែត្រូវបានវាស់វែងសម្រាប់ស្រទាប់ខាងក្រោម fluorogenic និងផលិតផលទាំងពីរ ដោយប្រើប្រាស់ fluorescence spectroscopy ជាប់ទាក់ទងគ្នា។មេគុណនៃការសាយភាយបកប្រែសម្រាប់ស្រទាប់ខាងក្រោម fluorogenic និងផលិតផលអ៊ីដ្រូលីស្ទីកអង់ស៊ីមត្រូវបានវាស់ឱ្យស្រដៀងគ្នាក្នុងចន្លោះពី 3.5–4.5 × 10−10 m2 s−1 ។ដូច្នេះ ការធ្វើឱ្យប្រសើរឡើង ឬការថយចុះនៃ kinetics អង់ស៊ីម ដោយសារតែភាពខុសគ្នានៃការចល័តនៃការបកប្រែនៃស្រទាប់ខាងក្រោម និងផលិតផលគឺមិនច្បាស់នោះទេ។