ផលិតផល

X-gal (ជាអក្សរកាត់ BCIG សម្រាប់ 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactopyranoside) គឺជាសមាសធាតុសរីរាង្គដែលមាន galactose ភ្ជាប់ទៅនឹង indole ជំនួស។សមាសធាតុនេះត្រូវបានសំយោគដោយ Jerome Horwitz និងអ្នកសហការក្នុងឆ្នាំ 1964។ ឈ្មោះគីមីផ្លូវការជារឿយៗត្រូវបានកាត់ឱ្យខ្លីទៅមិនសូវត្រឹមត្រូវ ប៉ុន្តែក៏មានឃ្លាដែលស្មុគស្មាញតិចជាងដូចជា bromochloroindoxyl galactoside ។X ពី indoxyl អាចជាប្រភពនៃ X នៅក្នុងការកន្ត្រាក់ X-gal ។ជារឿយៗ X-gal ត្រូវបានគេប្រើនៅក្នុងជីវវិទ្យាម៉ូលេគុល ដើម្បីធ្វើតេស្តរកវត្តមានអង់ស៊ីម β-galactosidase ជំនួសឱ្យគោលដៅធម្មតារបស់វា β-galactoside ។វាក៏ត្រូវបានគេប្រើដើម្បីរកមើលសកម្មភាពនៃអង់ស៊ីមនេះនៅក្នុងជីវគីមីវិទ្យា និងបាក់តេរី។X-gal គឺជាសារធាតុមួយក្នុងចំណោមសារធាតុ indoxyl glycosides និង esters ជាច្រើនដែលផ្តល់ទិន្នផលសមាសធាតុពណ៌ខៀវដែលមិនអាចរលាយបានស្រដៀងនឹងថ្នាំជ្រលក់ indigo ដែលជាលទ្ធផលនៃអ៊ីដ្រូលីស៊ីតដែលបំប្លែងអង់ស៊ីម។

X-gal គឺជាអាណាឡូកនៃ lactose ហើយដូច្នេះអាចត្រូវបាន hydrolyzed ដោយអង់ស៊ីម β-galactosidase ដែលបំបែកចំណង β-glycosidic នៅក្នុង D-lactose ។X-gal នៅពេលដែលត្រូវបានកាត់ដោយ β-galactosidase ផ្តល់ទិន្នផល galactose និង 5-bromo- 4-chloro-3-hydroxyindole - 1. បន្ទាប់មកបន្ទាប់មក dimerizes ដោយឯកឯង ហើយត្រូវបានកត់សុីទៅជា 5,5'-dibromo-4,4'-dichloro -indigo - 2 ជាផលិតផលពណ៌ខៀវខ្លាំងដែលមិនអាចរលាយបាន។X-gal ខ្លួនវាគ្មានពណ៌ ដូច្នេះវត្តមានរបស់ផលិតផលពណ៌ខៀវអាចត្រូវបានគេប្រើជាការធ្វើតេស្តសម្រាប់វត្តមានសកម្ម β-galactosidase ។នេះក៏អនុញ្ញាតឱ្យបាក់តេរី β-galactosidase (ដែលគេហៅថា lacZ) ត្រូវបានប្រើជាអ្នករាយការណ៍នៅក្នុងកម្មវិធីផ្សេងៗ។

នៅក្នុងការវិភាគកូនកាត់ពីរ β-galactosidase អាចត្រូវបានប្រើជាអ្នករាយការណ៍ដើម្បីកំណត់អត្តសញ្ញាណប្រូតេអ៊ីនដែលមានអន្តរកម្មជាមួយគ្នា។នៅក្នុងវិធីសាស្រ្តនេះ បណ្ណាល័យហ្សែនអាចត្រូវបានពិនិត្យរកមើលអន្តរកម្មប្រូតេអ៊ីនដោយប្រើប្រព័ន្ធមេផ្សិត ឬបាក់តេរី។នៅកន្លែងដែលមានអន្តរកម្មជោគជ័យរវាងប្រូតេអ៊ីនដែលកំពុងត្រូវបានពិនិត្យ វានឹងនាំទៅដល់ការភ្ជាប់ដែនសកម្មមួយទៅកាន់អ្នកផ្សព្វផ្សាយ។ប្រសិនបើអ្នកផ្សព្វផ្សាយត្រូវបានភ្ជាប់ទៅនឹងហ្សែន lacZ ការផលិត β-galactosidase ដែលនាំឱ្យមានការបង្កើតអាណានិគមពណ៌ខៀវ - សារធាតុពណ៌នៅក្នុងវត្តមានរបស់ X-gal ដូច្នេះនឹងបង្ហាញពីអន្តរកម្មជោគជ័យរវាងប្រូតេអ៊ីន។បច្ចេកទេសនេះអាចត្រូវបានកំណត់ចំពោះការពិនិត្យបណ្ណាល័យដែលមានទំហំតិចជាងប្រហែល 106។ ការបំបែកដោយជោគជ័យនៃ X-gal ក៏បង្កើតក្លិនមិនល្អគួរឱ្យកត់សម្គាល់ផងដែរ ដោយសារតែភាពប្រែប្រួលនៃ indole ។

ដោយសារ X-gal ខ្លួនវាគ្មានពណ៌ វត្តមានរបស់ផលិតផលពណ៌ខៀវអាចត្រូវបានគេប្រើជាការធ្វើតេស្តសម្រាប់វត្តមានរបស់ β-galactosidase សកម្ម។

ការកំណត់អត្តសញ្ញាណដ៏ងាយស្រួលនៃអង់ស៊ីមសកម្មនេះអនុញ្ញាតឱ្យហ្សែនសម្រាប់ βgalactosidase (ហ្សែន lacZ) ត្រូវបានប្រើជាហ្សែនអ្នករាយការណ៍នៅក្នុងកម្មវិធីផ្សេងៗ។