ផលិតផល

ដើម្បីកំណត់បរិមាណមេតាបូលីតជាច្រើននៃ 5-fluorouracil (5-FU) និងនុយក្លេអូទីត monophosphate endogenous ពីរ យើងបានបង្កើតវិធីសាស្ត្រដើមមួយដោយផ្អែកលើវត្ថុរាវ chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS)។ការវិភាគនេះបានអនុញ្ញាតឱ្យមានការប្តេជ្ញាចិត្តនៃ: (i) ការផលិត intracellular នៃ 5-fluoro-2′-deoxyuridine-5′-monophosphate (5-FdUMP) ពី 5-FU ឬ 5-fluoro-2′-deoxyuridine (5-FdUrd) , (ii) ផលប៉ះពាល់នៃកំហាប់ 5-FdUMP នៅលើកោសិកាខាងក្នុង 2′-deoxyuridine-5′-monophosphate (dUMP)/thymidine-5′-monophosphate (TMP) សមាមាត្រ និង (iii) វិសាលភាពសម្ងាត់នៃ 5-FdUMP និង 5-FU ពីកោសិកាវប្បធម៌របស់មនុស្សដោយអ្នកដឹកជញ្ជូន ABC ។នៅក្រោមលក្ខខណ្ឌពិសោធន៍របស់យើង កោសិកាត្រូវបាន incubated ជាមួយ 5-FU ឬ 5-FUrd ។បន្ទាប់មកប្រូតេអ៊ីនកោសិកាត្រូវបាន precipitated ដោយមេតាណុល។នីតិវិធីនេះបានផ្តល់នូវការងើបឡើងវិញនៃការស្រង់ចេញខ្ពស់។លើសពីនេះទៀត ដើម្បីវាស់ស្ទង់ការសម្ងាត់ 5-FU និង 5-FdUMP ពីកោសិកា យើងបានអនុវត្តបរិមាណនៃម៉ូលេគុលទាំងនេះនៅក្នុងឧបករណ៍ផ្ទុកវប្បធម៌។ប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយត្រូវបានចាក់ដោយផ្ទាល់ (5-FU) ឬស្ថិតនៅក្រោមការទាញយកដំណាក់កាលរឹងដោយប្រើប្រអប់ព្រីន Oasis Wax (5-FdUMP) ។ការបំបែកការវិភាគត្រូវបានអនុវត្តនៅលើជួរឈរ dC18 Atlantis 3.5 μm, (100 mm × 2.1 mm id) ជាមួយនឹងរបៀប isocratic ដោយប្រើ ammonium formate buffer/methanol/water (5/5/90, v/v) ជាដំណាក់កាលចល័ត។ពេលវេលារត់មិនលើសពី 6.2 នាទី។ការវិភាគត្រូវបានអ៊ីយ៉ូដនៅក្នុងចំណុចប្រទាក់ electrospray ក្រោមរបៀបអ៊ីយ៉ុងអវិជ្ជមាន។យើង​បាន​ធ្វើ​ឱ្យ​មាន​សុពលភាព​វិធីសាស្ត្រ​ក្នុង​ចន្លោះ​ពី 2.5-150 ng mL −1 យោង​តាម​សមាសធាតុ។ភាពប្រែប្រួលក្នុងចន្លោះ និងអន្តរតេស្តគឺទាបជាង 10% ក្នុងរយៈពេលប្រាំពីរថ្ងៃ។សមាសធាតុទាំងអស់មានស្ថេរភាពនៅក្នុងកោសិកា ឬក្នុងឧបករណ៍ផ្ទុកវប្បធម៌ នៅពេលដែលសំណាកត្រូវបានរក្សាទុកនៅ −20 °C យ៉ាងហោចណាស់ពីរសប្តាហ៍ ហើយបន្ទាប់ពីវដ្តត្រជាក់ចំនួនបី។គ្មានឥទ្ធិពលម៉ាទ្រីសត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅក្នុងប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយទាំងពីរទេ។